（1）了解仪器各部分的构造和功能及分析的原理
（2）掌握样品、流动相的处理、仪器的维护等基本知识
（3）学会简单样品的分析操作过程
（4）掌握HPLC分析的定性、定量方法
2.基本原理
高效液相色谱仪以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的主色谱分离技术，在基本理论方面与气相色谱没有显著不同，它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质差别。与气相色谱相比，高效液相色谱对样品的适用性强，不受分析对象挥发性和热稳定性的，可以弥补气相色谱法的不足。
对于酚类化合物的测定，其基本原理是这样的：先用固相小柱吸附水中酚类化合物，然后用溶剂洗脱，经氮吹气浓缩至一定体积后，用反相高压液相色谱法分析。在反相色谱柱上以甲醇/（水+乙酸）为流动相把经预处理的酚类化合物分离，用二极阵列检测器或紫外检测器，测定各种酚的峰高或峰面积，以外标法定量。
3.仪器与试剂
3.1仪器：高效液相色谱仪：可编程紫外检测器
微量注射器：50μL、100μL
色谱柱：C18或C8柱
化学工作站
尖底浓缩瓶：10ml 具刻度
富集柱
3.2试剂：流动相：甲醇/高纯水(需Φ0.22μm滤膜过滤)
标准物：六种酚类混合物
洗脱液：正己烷、 四氢呋喃(需重蒸)
硫酸
冰醋酸
无水亚硫酸钠
4.所用仪器的主要组件
(1) 高压输液泵
主要部件之一，压力：150×105～350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。
(2) 梯度淋洗装置
外梯度（高压梯度）：用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。
内梯度（低压梯度）：一台高压泵，通过比例调节阀，将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置。
(4) 高效分离柱
柱体为直形不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
(5) 液相色谱检测器
Ⅰ 紫外检测器
应用最广，对大部分有机化合物有响应。
特点：灵敏度高，线形范围宽；流通池可做得很小(1mm×10mm，容积8μL)；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。
Ⅱ 光电二极管阵列检测器
光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。
Ⅲ 示差折光检测器
除紫外检测器之外应用最多的检测器。可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度成正比。
Ⅳ 荧光检测器
高灵敏度，高选择性。对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。
5.数据处理
（1）原始数据
实验所得色谱图
①根据标准样品的实验数据，做出峰面积随浓度变化的标准曲线。
②根据标准曲线，计算实际单标中的物质浓度
单标为8ppm的标样物质实际浓度： C=7.990ppm